作者: 杨丽红、豆威、蒋红波、牛金志、丁天波、王进军

摘要: 【目的】研究热激蛋白基因Hsp90在柑橘全爪螨Panonychus citri生长发育及响应高温和低温胁迫方面的作用。【方法】采用RT-PCR和RACE技术克隆柑橘全爪螨Hsp90基因cDNA全长序列；利用生物信息学软件分析该基因的序列特性；运用荧光Real-time PCR技术，分析Hsp90基因mRNA在该螨各发育阶段、高温及低温胁迫条件下的表达模式。【结果】克隆鉴定出柑橘全爪螨一条Hsp90基因的cDNA全长序列，命名为PcHsp90（GenBank登录号：GQ495086），全长为2763 bp，包含2193bp的开放阅读框，编码730个氨基酸，编码蛋白质的理论分子量和等电点分别为83.85kDa和4.99，氨基酸序列包括Hsp90家族的5个特征基序及细胞质型Hsp90的特征序列“MEEVD”。系统进化分析表明，PcHsp90与朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus的Hsp90首先聚为一支，然后再与肩突硬婢Ixodes scapularis的Hsp90聚合，说明它们较近的亲缘关系。PcHsp90在柑橘全爪螨的各发育阶段均有所表达，其中在幼螨期表达量较低，且显著低于若螨和成螨期的表达水平（P=0.015）。0-10℃低温胁迫下，PcHsp90的mRNA相对表达量无显著变化（P=0.492）；但在35-41℃高温胁迫下，PcHsp90的mRNA相对表达量随胁迫温度的升高而上调，尤其是当温度升高到41℃时，mRNA相对表达量达到对照（25℃）的6.75倍，且差异达显著水平（P=0.007）。【结论】柑橘全爪螨PHsp90不仅对该螨的生长发育具有重要作用，而且是其响应高温胁迫的重要机制之一。

关键词: 柑橘全爪螨；热激蛋白90；cDNA克隆；低温胁迫；高温胁迫；发育阶段；mRNA表达

DOI: 10.16380/j.kcxb.2016.04.006